Накопление алкалоидов в культуре ткани раувольфии змеиной

Страница 1

Культура ткани раувольфии змеиной (Rauwolfia serpentina) является перспективным источником аймалина – алкалоида группы индолина, обладающего противоаритмическим действием. Аймалин содержится в смеси алкалоидов биомассы в количестве 30-40%. 40-50% составляет вомиленин – индолениновый алкалоид, который рассматривается как биогенетический предшественник аймалина. Превращение вомиленина в аймалин под действием ферментов, выделенных из клеток раувольфии, в настоящее время осуществлено in vitro и включает в себя гидрирование вомиленина и его метилирование. Источником пиридиннуклеотидов является витамин РР (никотиновая кислота и никотинамид). Перенос метильных групп осуществляется с помощью серосодержащих аминокислот – метионина и ацетилметионина.

Целью настоящей работы было выяснение влияния витамина РР, серосодержащих аминокислот, вомиленина (как предшественника аймалина) и сульфат-иона на накопление алкалоидов, в частности, аймалина в стеблевой культуре ткани раувольфии (клеточная линия А). В качестве контроля использовали регламентную питательную среду (Р). В опытных вариантах в неё вносили 2 или 5 мг/л никотиновой кислоты (среды Н2 и Н5), 10 мг/л метионина или ацетилметионина (среды М и АМ), 1 мг/л вомиленина (среда В). Вомиленин добавляли после автоклавирования среды в асептических условиях, остальные добавки вносили до автоклавирования. Среды S1 и S2 были обеднены неорганической серой: в S1 не вносили сульфат аммония; в S2, кроме того, в 5 раз уменьшили содержание сульфата магния. Опыты проводили на трёх пассажах в десятикратной повторности. После культивирования в течение 70-75 суток при 26±20 биомассу высушивали. В ней титриметрически определяли сумму алкалоидов, фотоколориметрическим методом – аймалин, хроматоспектрофотометрическом – вомиленин.

Результаты опытов приведены в таблице. Они показывают, что добавление к среде никотиновой кислоты не влияло на содержание алкалоидов в биомассе. Снижение содержания в среде сульфат-иона привело к уменьшению количества суммы алкалоидов, аймалина – в 1,5 раза, и к возрастанию (приблизительно в 2 раза) содержания в биомассе вомиленина. При введении в среду серосодержащих аминокислот в 1,2 раза увеличилось общее содержание алкалоидов в биомассе, а содержание аймалина возросло в 2 раза. Добавление вомиленина вызвало накопление в биомассе аймалина при сохранении контрольного уровня содержания суммы алкалоидов. Это вполне согласуется с литературными данными о превращении вомиленина в аймалин.

Накопление алкалоидов в биомассе в зависимости от состава среды

Количество биомассы или алкалоидов

Питательная среда

Р

Н2

Н5

S1

S2

М

АМ

В

Биомасса, г/1л среды

29,0±2,5

27,5±3,3

27,8±4,6

24,6±3,0

27,3±3,8

24,0±2,0

25,6±2,7

25,3±2,7

Сумма алкалоидов

Мг/1л среды

472±31

490±49

506±36

310±32

314±24

463±45

440±38

416±13

% к воздушно-сухой массе

1,63±0,11

1,78±0,18

1,82±0,13

1,26±0,13

1,15±0,09

1,93±0,19

1,72±0,15

1,64±0,05

Аймалин

Мг/1л среды

130±7

115±22

111±19

59±7

82±10

276±23

307±32

207±45

% к воздушно-сухой массе

0,45±0,05

0,42±0,08

0,40±0,07

0,24±0,05

0,30±0,03

1,15±0,12

1,20±0,07

0,82±0,18

% к сумме алкалоидов

28,8

23,6

22,1

19,0

26,1

59,2

69,8

50,0

Вомиленин

Мг/1л среды

116±15

82±1

86±4

150±17

142±19

115±12

128±3

96±10

% к воздушно-сухой массе

0,40±0,05

0,30±0,02

0,31±0,03

0,61±0,07

0,52±0,07

0,48±0,05

0,50±0,01

0,38±0,04

% к сумме алкалоидов

24,5

17,0

17,0

48,4

45,2

24,8

29,0

23,1

Страницы: 1 2

Разделы

Источники витамина B6

Активностью витамина В6 обладает группа соединений, производных пиридина, объединяемых общим названием "пиридоксин".

Источники витамина B1

Витамин B1 - водорастворимый витамин, легко разрушается при тепловой обработке в щелочной среде.

Источники витамина A

Впервые витамин А был выделен из моркови, поэтому от английского carrot (морковь) произошло название группы витаминов А - каротиноиды.